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一、罗丹明b的结构式？化学性质？

一、罗丹明b的结构式？化学性质？

类别：科学与工程分析：食品中罗丹明B（玫瑰红）现场快速检测和实验室检测方法食品中罗丹明B（玫瑰红）现场快速检测和实验室检测方法（大连产品质量监督检验所） 1.定义：罗丹明B是一种合成染料，呈亮粉色，英文名称：Rhodamine B；分子式C28H31ClN2O3；分子量479.0175；结构式： 罗丹明B在溶液中具有较强的荧光，在实验室中用作细胞荧光染色剂、有色玻璃、特种烟花爆竹等行业。不允许食用染色。 2、检测原理罗丹明B为脂溶性，用作调味品（主要是辣椒粉和辣椒油）的染料。在食品加工中使用受污染的调味品时会产生残留。调味品用罗丹明B染色时，含量更高，甚至直接掺入，可以现场检测。由于其含量较低，食品需要送到实验室进行检测。现场检测时采用非极性有机溶剂（如正己烷、正己烷+丙酮等）对其进行溶解、萃取。萃取液流经中性氧化铝固相萃取柱，吸附罗丹明B。用溶剂（如正己烷）洗脱小柱，洗脱样品油脂和内源性食品干扰物质。肉眼可在小柱上观察到亮粉色条带，判断为可疑样品，需将样品送去实验。进一步验证性测试的空间。实验室检测方法仍采用非极性有机溶剂（如正己烷、正己烷+丙酮等）从食品中溶解提取罗丹明B。萃取液流经中性氧化铝固相萃取柱，吸附罗丹明。 B、用非极性有机溶剂（如正己烷）洗脱样品油脂和内源性食品干扰物质，然后用极性有机溶剂（如甲醇）洗脱并从柱上收集罗丹明B，用反相色谱柱高效液相色谱-紫外/可见光检测器用于定性和定量检测。 3 3.试剂和材料3.1 色谱用中性氧化铝（100目）。使用前以105C烘烤2小时。将其从干燥器中取出并冷却至室温。将其放入玻璃瓶中并密封放置。 3.2 正己烷（分析纯）；丙酮（分析纯）；甲醇（色谱纯）； 3.3 20%丙酮正己烷溶液：将100ml 丙酮与400ml 正己烷混合，作为罗丹明B 的提取液和纯化液。 3.4 氧化铝固相萃取柱：取5ml 塑料注射管，插入一小段将脱脂棉放入下口，填入加工后的氧化铝约3cm高，备用。 3.5 罗丹明B 标准溶液：称取罗丹明B（分析纯试剂沉阳试剂三厂）5.0mg，用20%丙酮的正己烷溶液（3.3）溶解并定容至50ml，配制成溶液。含量为100ug/ml。标准储备溶液。取该溶液0、0.25、0.5、0.5、1.0、2.0、4.0ml，用20%丙酮的正己烷溶液（3.3）稀释并定容至50ml，定为浓度0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0ug/ml标准系列溶液。 3.6 玻璃器皿4. 现场快速检测方法4.1 辣椒粉取一小勺（约5g）辣椒粉放入小烧杯中，加入约40ml 含20%丙酮的正己烷（3.3），摇匀或搅拌2分钟，静置。

取5ml塑料注射器套，下口插入一小块脱脂棉，将预处理好的氧化铝（3.1项）倒入注射器管内至高度约3cm，制成氧化铝固相萃取柱。等到它位于样品杯上方。澄清后，缓慢倒入小柱中，下端接废液杯，根据颜色倒入2-5ml。注意不要倒太多，并保证小柱的中下部仍然是白色的。此时，其中含有罗丹明。样品B 在色谱柱的上部会有一条亮粉色荧光条，边缘清晰。随着含量的增加，粉红色会加深和变宽。不含罗丹明B的样品提取液不会出现粉红色条带，只会出现黄红色界面不清晰的宽条带，然后将20ml含20%丙酮的正己烷（3.3）慢慢倒入小柱中。粉红色条带不会向下移动，但会更清晰，其余黄红色条带向下移动，大部分可被洗脱，可判断为含有罗丹明B的可疑样品。 4.2 辣椒油取一小勺（约2g）辣椒油放入小烧杯中，加入约10ml正己烷（3.2），搅拌均匀。按照4.1项“取5毫升塑料注射器套筒……即可判断为含有罗丹明B的可疑样品。” 4.3 测定初步判定含有罗丹明B的可疑样品需送实验室进行液相色谱确证检测。 5. 实验室测试方法5.1。仪器高效液相色谱仪（双泵，紫外/可见光检测器） 色谱柱C18 4.6mm X 15cm（5m） 5.2 5.2.1 辣椒粉：取辣椒粉1g,加入20ml含20%丙酮的正己烷(3.3),摇匀10分钟，静置或过滤分离上清液，加入10ml 20%丙酮丙酮至残渣，用正己烷（3.3）重复提取一次，将两次提取液合并，混匀，用滴管将上清液加入到氧化铝柱（3.4）中【柱子用5ml提取液润湿（ 3.3）提前]，根据颜色深度确定列加载量。确保上样后柱的中下部仍为白色。含有罗丹明B的样品提取物会在柱的上部出现亮粉色荧光条，并且粉色条随着含量的增加而增加。随着它的增加，它会加深和扩大。不含罗丹明B的样品提取物不会出现粉红色条带，而只会出现一条黄红色的不清晰宽带。用含有20%丙酮的正己烷（3.3）洗柱。粉红色的带子并没有向下移动，而是更加清晰。黄红色带的其余部分向下移动并且大部分可以被洗脱。可判断为含有罗丹明B的可疑样品。当柱流出液无色时，滴入5-10ml甲醇，洗去罗丹明B色带并收集。用甲醇稀释体积后，注入高效液相色谱仪确认。 5.2.2.辣椒油：称取1g辣椒油，加入10ml含20%丙酮的正己烷（3.3），混合均匀后滴入氧化铝柱（3.4）中。按照5.2.1中的说明“使用滴管除去上清液”。添加氧化铝滤芯……注入高效液相色谱仪确认”后进行。 5.2.3.其他食品：用红辣椒油（粉）调味的食品（如红油豆制品、红油鱼干等）。 ），称取10-20g，用20%丙酮和正己烷（3.3）红油（粉末）洗涤，或将样品与洗脱液搅拌成匀浆，溶解并提取罗丹明B。将样品液静置或离心至分离有机相，根据水量加入适量无水硫酸钠进行脱水，按5.2.1“用滴管将上清液加入氧化铝柱.注入高位-高效液相色谱仪确认。”对于含量低的样品，粉红色条带太窄，颜色浅，肉眼看不清楚。仍可采用上述方法，进一步用20%洗墨盒丙酮和正己烷(3.3)直至流出液无色，滴入5 -10ml甲醇，洗去罗丹明B条带并收集。浓缩后注入高效液相色谱仪进行确证检测。

5.3 液相色谱条件5.3.1 色谱柱：C18 4.6mm 仪器；波长：550nm 5.3.4 定性定量：罗丹明B标准溶液保留时间定性，外标法定量。 5.4 结果计算Y=CV/M Y—— 样品中罗丹明B 的含量（mg/kg） C—— 由标准曲线求得的罗丹明B 浓度（ug/ml） V—— 供试品总定容体积（ml） M—— 样品称量量（g） 5.5 注：C18 色谱柱性能不同，流动相浓度应稍作调整。 在本方法给出的分离条件下，样品基质在罗丹明B附近没有干扰峰。许多其他红色偶氮染料都能在罗丹明B之后发射峰。注意调整这些干扰峰与罗丹明B之间的分离。干扰成分包括：苏丹橙G、Parred 红、苏丹红7B、苏丹红I、苏丹红II、苏丹红III 和苏丹红IV。

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