培养细胞的牛血清蛋白可以用作作标准曲线吗 牛血清白蛋白的相对分子质量

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一、培养细胞的牛血清蛋白可以用作作标准曲线吗

一、培养细胞的牛血清蛋白可以用作作标准曲线吗

牛血清白蛋白(B-步步高SA)，又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，含有583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白360问答蛋白在生化实验中应用广泛，例如在western bl读写ot中作为封闭剂。

它可以通过向10g中加入100ml水来溶解，或者通过PBS来溶解，这取决于应用。然后再分装成小分支。如果不使用防腐剂，可在零下20或30摄氏度的恒温箱中保存，如果使用防腐剂(如0吉智劳商赫旭格. 1%叠氮化钠)，可在零下4摄氏度的环境中保存。一般可以存放数月不变质。防腐剂可能影响牛血清白蛋白的效果，应慎用。

牛血清中的简单蛋白是血液的主要成分(38g/100ml)，分子量为68kD。等电点4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。只含有己糖和己糖胺，脂肪含量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，35个半胱氨酸矛如何形成17个二硫键，肽链第34位有一个游离巯基。白蛋白可以与许多阳离子、阴离子和其他小分子结合。

血液中的白蛋白主要起到维持渗透压、PH缓冲、载体和营养的作用。在动物细胞的无血清培养中，加入白蛋白可以起到生理和机械的保护和载体作用。牛血清白蛋白(BSA)，又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，含有583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白广泛用于生物化学实验，例如，在蛋白质印迹中作为封闭剂。

BSA一般用作限制性内切酶或修饰酶的保存液和反应液中的稳定剂，因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后，可能会起到“保护”或“载体”的作用，很多酶加入BSA后可以大大提高其活性。不需要添加BSA的酶一般不受任何火烧试验的影响。对于大多数底物DNA，BSA可以使酶消化更完全，实现重复切割。

在37下，酶切反应持续1h以上时，BSA能使酶更稳定，因为许多限制性内切酶在没有BSA的反应缓冲液中只能存活10'20min甚至更短时间。而BSA可以与缓冲液或底物DNA中的金属离子等化学物质结合，重新研究某种酶的活性。

1.BSA是酶的稳定剂，可以防止酶的分解和非特异性吸附；2.BSA可以减轻一些酶的变性和一些不利的环境因素如加热、表面张力和化学因素。至于作用机理，我不是很清楚，可能是因为它有17个二硫键和一个巯基，巯基的化学反应很活跃。二硫键具有抗氧化和还原作用，因此它可以与许多阳离子、阴离子和小分子结合。3.BSA可以防止酶吸附在管壁上而流失。

牛血清白蛋白(BSA)的相对分子量在1串0的4次方水平，不确定，是聚合物。有的地方BSA的分子式数据是7 Li Bang 0 000，这是PCR用的数据。

牛血清白蛋白(BSA)是血液的主要成分(38g/100ml)。分子量68kD，等电点4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，只有己糖和己糖胺，脂肪含量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸构成17个二硫键，肽链第34位有一个游离巯基。白蛋白可以与许多阳离子、阴离子和其他小分子结合。牛血清白蛋白溶液可用作测定蛋白质含量的标准曲线。

一般买回的牛血清白蛋白都是细片状乳白色粉末。牛血清蛋白也是基于铁的。用途1、超纯牛血清蛋白用途：用作酶标、金标等诊断试剂和生化检验的封闭剂。电场对牛血清白蛋白保留率的影响：淡黄色干粉2、不含脂肪酸的牛血清白蛋白用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂和保护剂，特别适用于易受脂肪酸影响的产品和实验。

性状：淡黄色干粉3、无蛋白酶牛血清白蛋白用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂和保护剂，特别适用于血脂诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。说明：淡黄色干粉4、细胞培养级牛血清蛋白用途：无血清培养基用于细胞培养的蛋白添加剂。性状：淡黄色干粉白蛋白[1]测定：标准曲线

一般用分光光度法测定一种物质的含量，要先做标准曲线，然后根据标准曲线就可以查出被测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测和分析的一项基本技术。测定方法1。凯氏定氮法2。缩二脲法3。福林酚试剂法4。紫外线吸收法。考马斯亮蓝法[1]标准曲线制作：试剂1。考马斯亮蓝试剂：

考马斯亮蓝G-250 100mg溶于50ml 95%乙醇中，加入100ml 85% H3PO4，用蒸馏水稀释至1000ml，用滤纸过滤。最终试剂包含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G-250、4.7% (w/v)乙醇和8.5%(W/V)H3PO4。2.标准蛋白溶液：纯牛血清白蛋白。预先用凯氏定氮法测定蛋白质的含氮量，根据其纯度用0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白质溶液。装备：1。722S分光光度计的使用和原理。2.移液管的使用。[1]制造步骤

0123456100 g/ml号管标准蛋白(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6考马斯亮蓝试剂(ml)5 5 5 5 5 5 5 5摇匀，1h内1号管作为空白对照。595nm处的比色法为3、，以595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标(VI (1)用标准曲线找出回归方程。(2)用公式计算回归方程。

(3)、或用原点画出测量回归的线性方程。即A595nm=aX() 6的一般相关系数应该在0.999以上，至少是两个9。(4)作图时，近两点在一条直线上，直线上的点应在直线的两侧。含量的测定样品是被测蛋白质含量的样品(含量应在测定范围内)。按照操作步骤1，测量样品的A595nm，然后利用标准曲线或回归方程计算样品的蛋白质含量。

一般待测样品的A595nm值在0.1-0.05之间，所以如果上述样品的A595nm值过大，可以稀释后测得A595nm值，再进行计算。注意事项：1。玻璃仪器应该清洗干净。2.量要准确。3.玻璃仪器应干燥，以避免温度变化。4.对照：用供试品以外的物质作为空白对照。希望对你有用，有帮助。

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