高效液相色谱仪基本知识? 高效液相色谱仪的用途
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一、高效液相色谱仪基本知识?
高效液相色谱的基本原理一、实验目的1。了解高效液相色谱分离的基本原理;2.了解高效液相色谱的基本结构;3.了解高效液相色谱的基本操作。
基本原理二、高效液相色谱(HPLC)是以高压下的液体为流动相,以极细颗粒为高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,弥补了气相色谱的不足。在已知的有机化合物中,大约20%可以用气相色谱分析,而80%需要用高效液相色谱分析。
高效液相色谱和气相色谱在基础理论上没有明显区别,但两者的主要区别在于作为流动相的液体和气体的性质不同。高效液相色谱原理;
(HPLC分析的过程:储液瓶中的溶剂被泵吸入色谱系统,然后输出,经过流量和压力测量后引入采样器。被测物质由进样器注入,通过流动相色谱柱,在柱上分离后进入检测器。检测信号由数据处理设备采集和处理,并记录色谱图。废液流入废液瓶。在复杂混合物分离的情况下(宽极性范围),梯度控制器也可用于梯度洗脱。
这类似于气相色谱的程序升温,只是气相色谱改变的是温度,而HPLC改变的是流动相的极性,使样品的组分在最佳条件下得到分离。
(2)高效液相色谱的分离过程:和其他色谱过程一样,高效液相色谱是溶质在固定相和流动相之间的连续多次交换过程。它通过两相之间的分配系数、亲和力、吸附力或分子大小的差异来分离不同的溶质。
二、高效液相色谱仪转子作用?
1、溶剂输送系统;储液器用于储存足够的符合要求的流动相。配有溶剂过滤器,以防止流动相中的颗粒进入泵中。脱气器,脱气的目的是防止流动相从色谱柱流出时释放气泡进入检测器,造成噪音,不能正常检测。
输液泵,储液器中的流动相以高压的形式不断进入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。梯度洗脱装置是在分离过程中通过逐渐改变流动相的组成来增加洗脱能力的装置。2、取样系统;进样器:是将样品送入色谱柱的装置。取样方法可分为两种:阀门取样或自动取样。自动进样器通常用于装载样品。
3、分离系统;色谱柱:分离样品是整个色谱系统的心脏,其质量直接影响分离效果。4、西州检测染B损失永久测试仪系统;检测器:从色谱柱中连续流出的样品组分被转换成易于测量的电信号,由数据系统接收,得到样品分离的色谱图。5、数据处理和记录系统;处理色谱数据并参与HPLC仪器的自动控制。
三、请问HPLC是做什么的?原理?操作方法?
HPLC是高效液相色谱,英文全称是高效液相色谱。该方法在化学、医学、工业、农业、商品检验和法律检验中作为一种重要的分离分析技术。
用途:高效液相色谱更适用于沸点高、热稳定性差、生理活性大、分子量相对较大的物质的分离分析,因此广泛用于核酸、多肽、内酯、多环芳烃、聚合物、药物、人体代谢产物、表面活性剂、抗氧化剂、农药、除草剂等物质的分析。
原理:HPLC以液体为流动相,采用高压灌注系统将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂和缓冲溶液等流动相泵入装有固定相的色谱柱中。柱内组分分离后,进入检测器进行检测,从而实现样品的分析分离。
操作方法:如下图所示,溶剂池中的流动相由泵吸入,由梯度控制器按一定梯度混合,然后输出。测量其压力和流量后,引入进样阀(装置),经过保护柱和分离柱,再由检测器检测。数据由数据处理设备处理或由记录仪记录色谱图,馏分由馏分收集器收集,废液由废液瓶收集。
扩展资料:在液相色谱的初始阶段,流动相是在室温、常压、有液面差的情况下,用大口径玻璃管柱输送的,称为经典液相色谱。这种方法柱效低,时间长(往往几个小时)。高效液相色谱是20世纪60年代末在经典液相色谱的基础上引入气相色谱理论而迅速发展起来的。高效液相色谱根据固定相和流动相的组成可分为正相色谱和反相色谱。正相色谱
采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基和腈键合相);流动相为相对非极性的疏水溶剂(正己烷、环己烷等烷烃),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、氯仿来调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和强极性的化合物(如酚类、胺类、羰基和氨基酸)。反相色谱法
一般为非极性固定相(如C18、 c8);)被使用;流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等水溶性有机溶剂调节保留时间。它适用于分离非极性和弱极性化合物。RPC是现代液相色谱中应用最广泛的方法。据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。参考:百度百科-HPLC
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