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一、双缩脲试剂检验蛋白质的原理和条件？

二、双缩脲试剂的反应原理是什么？

三、蛋白质和双缩脲试剂是什么颜色

一、双缩脲试剂检验蛋白质的原理和条件？

缩二脲法鉴别蛋白质的分析方法缩二脲法是一种鉴别蛋白质的分析方法。缩二脲试剂是一种碱性含铜试液，颜色为蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。当底物含有肽键(多肽)时，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。浓度可通过比色法分析，紫外-可见光谱中的波长为540nm。识别反应的灵敏度为5-160毫克/毫升。鉴定反应的蛋白质单位为1-10毫克。

基本信息中文名缩二脲法mbth成分氢氧化钾、硫酸铜、酒石酸钾钠名词解释：缩二脲试验产生的紫色络合物颜色与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子量和氨基酸组成无关，因此可以用来测定蛋白质的含量。缩二脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，氢氧化钾只是提供碱性环境，所以可以用其他碱代替，比如氢氧化钠。在试剂中加入碘化钾可以延长试剂的使用寿命。

基本概况实验原理缩二脲(NH _ 2 ConHCONH _ 2)是两分子尿素在180左右加热，释放出一分子氨的产物。在强碱性溶液中，缩二脲与铜离子形成紫色络合物，称为缩二脲试验。所有含有两个酰胺基或两个直接相连的肽键，或可以通过中间碳原子相连的肽键的化合物都有缩二脲试验。

紫色络合物的颜色与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量和氨基酸组成无关，因此可以用来测定蛋白质的含量。干扰该测定的主要物质是硫酸铵、Tris缓冲液和一些氨基酸。这种方法的优点是速度快，不同蛋白质产生的颜色深浅相似，干扰物质少。主要缺点是灵敏度差，不适合微量蛋白质的测定。试剂和设备。试剂：1。试剂：

(1)标准蛋白溶液：用标准结晶牛血清白蛋白(BSA)或标准酪蛋白配制10mg/ml的标准蛋白溶液，纯度可用1mg/ml BSA的A280校正为0.66。如果需要，标准蛋白也可以预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算其纯度，然后根据其纯度称量配制标准蛋白溶液。用H2O或0.9%NaCl制备牛血清白蛋白，用0.05N NaOH制备酪蛋白。

(2)缩二脲试剂：称取1.50克硫酸铜(CuSO4 5H2O)和6.0克酒石酸钾钠(KNaC4H4O6 4H2O)，溶于500毫升水中，边搅拌边加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释至1升，贮存于塑料瓶(或内壁涂有石蜡的瓶)中。这种试剂可以保存很长时间。如果储存瓶中出现黑色沉淀，则需要重新配制。2.装备：2。设备：可见光分光光度计、15个大试管、涡旋混合器等。操作方法

标准曲线的测定：将12支试管分成两组，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml标准蛋白溶液，用水补足至1 ml，再加入4 ml缩二脲试剂。充分摇匀后，室温(20~25)放置30分钟，于540nm处进行比色测定。第一个没有蛋白质溶液的试管用作空白对照溶液。取两组平均值，以蛋白质含量为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。

2、样品的测定：取2~3支试管，用与上述相同的方法测定未知样品的蛋白质浓度。注意，样品浓度不应超过10毫克/毫升。

二、双缩脲试剂的反应原理是什么？

回答：缩二脲试剂最初是用来检测缩二脲的。由于蛋白质分子中含有许多类似缩二脲的肽键，在碱性溶液中也能与铜离子生成缩二脲试验。

双缩脲试剂是一种分析化学试剂，用于鉴别鸡蛋360的白质。它是一种碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1克/毫升氢氧化钠或氢氧化钾、0.01克总顺酐-推-猛相合夫文/毫升硫酸铜和酒石酸钾钠组成。你会遇到蛋白质，它是紫色的。

当底物含有肽键时(多肽可保护供体健康，改变饮食)，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。浓度可通过比色法分析，紫外-可见光谱中的波长为540nm。识别反应的灵敏度为5-160毫克/毫升。

缩二脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，氢氧化钾只是提供碱性环境，所以可以用其他碱代替，比如氢氧化钠。在试剂中加入碘化钾会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护抗血层中本应生成的络合离子沉淀成沉淀物，从而使试剂失效。[1]

需要注意的是，能与紫色双缩脲试剂反应的化合物分子中含有至少两个肽键。所以二肽不能用它来检验。一、优点：双缩脲法测定蛋白质的范围可达1~10mg蛋白质，操作简单快捷。它既适合手工操作，也适合自动分析，具有良好的重复性和线性关系。缩二脲试剂可以长期保存(如果保存瓶中出现黑色沉淀，则需要重新配制)。

二、缺点：灵敏度差，测量范围窄，样品需求量大，不同蛋白质产生的颜色深浅相似，所以常用于快速但不是很准确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括：性质为氨基酸或肽类的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性显色反应，铜离子也容易被还原，有时会出现红色沉淀。

三、蛋白质和双缩脲试剂是什么颜色

蛋白质与缩二脲试剂反应呈紫色。

缩二脲是通过在大约180摄氏度下加热两个尿素分子并释放一个氨分子而获得的产物。双缩脲试验用于双百麦丰剂检测双缩脲，因为蛋白质中也有肽基，也可用于检测蛋白质，与蛋白质接触后颜色为紫色。缩二脲试验的实质是铜离子与缩二脲在碱性环境下发生紫色反应。蛋白质分子中含有许多类似缩二脲的肽键，所以蛋白质可以与缩二脲试剂反应。

实验过程中，在含有蛋白质的溶液中加入等体积的NaOH溶液，然后加入几滴CuSO4溶液(量很小)，即依次加入NaOH和CuSO4溶液。如果在NaOH中混合几滴CuSO4溶液，然后加入到含有蛋白质的溶液中，混合溶液中就不会有-CH2-，不会发生显色反应，除了-CONH-有这个反应，-CONH2-缩二脲试剂的引入：

缩二脲试剂(mbth:缩二脲试剂)是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成，遇蛋白质变为紫色。

使用缩二脲试剂时，一定要注意，必须先加入0.1g/mL的氢氧化钠溶液，再加入0.01g/mL的硫酸铜水溶液。(如果先加入硫酸铜[CuSO4]溶液，再加入氢氧化钠[NaOH]溶液，不能完全创造碱性环境。此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀，导致出现不清晰现象，不能很好地达到实验目的。

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