SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是什么作用? 聚丙烯酰胺凝胶电泳原理示意图
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一、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是什么作用?
作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式。一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整状态,在电泳中根据蛋白质大小、形状、电荷三个因素分离蛋白质。
在电场的作用下,带电粒子可以在聚丙烯凝胶中迁移,迁移速度与带电粒子的大小、形态和电荷有关。十二烷基磺酸钠(SDS)能与蛋白质结合,改变蛋白质原有的构象,使其变成雪茄形的长椭圆棒,短轴长度相同,而长轴与分子量成正比。SDS-PGAE简介
原理:蛋白质溶液与SDS(十二烷基硫酸钠)混合。SDS作为表面活性剂时,会破坏蛋白质的二级结构并使其变性,将变性的蛋白质包裹起来,使其具有一致的负电荷(大约每两个氨基酸一个SDS)和一致的形状(长条状)。如果没有SDS使其负电荷一致,可能会使蛋白质具有相近的分子量。
分布在不同的位置,这种电泳方法是Native-PAGE。进行电泳时,分子量较小的更容易脱落,而分子量较大的则卡在起始点附近。虽然较大的电压可以缩短实验时间,但会得到模糊的结果,所以实验持续了几个小时。以上内容参考:百度百科——SDS-PGAE
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